لیشمانیوز احشایی (VL)، که در شبه قاره هند به عنوان کالاآزار شناخته می‌شود، یک بیماری انگلی است که توسط تک‌یاخته تاژک‌دار لیشمانیا ایجاد می‌شود و در صورت عدم درمان سریع می‌تواند کشنده باشد. پشه خاکی Phlebotomus argentipes تنها ناقل تایید شده VL در جنوب شرقی آسیا است، جایی که با سم‌پاشی باقیمانده در فضای داخلی (IRS)، یک حشره‌کش مصنوعی، کنترل می‌شود. استفاده از DDT در برنامه‌های کنترل VL منجر به ایجاد مقاومت در پشه‌های خاکی شده است، بنابراین DDT با حشره‌کش آلفا-سیپرمترین جایگزین شده است. با این حال، آلفا-سیپرمترین مشابه DDT عمل می‌کند، بنابراین خطر مقاومت در پشه‌های خاکی تحت استرس ناشی از قرار گرفتن مکرر در معرض این حشره‌کش افزایش می‌یابد. در این مطالعه، ما حساسیت پشه‌های وحشی و فرزندان F1 آنها را با استفاده از زیست‌سنجی بطری CDC ارزیابی کردیم.
ما پشه‌ها را از ۱۰ روستا در منطقه مظفرپور در بیهار هند جمع‌آوری کردیم. هشت روستا همچنان از پشه‌های با قدرت بالا استفاده می‌کردند.سیپرمترینبرای سم‌پاشی داخل ساختمان، یک روستا استفاده از سایپرمترین با قدرت بالا را برای سم‌پاشی داخل ساختمان متوقف کرد و یک روستا هرگز از سایپرمترین با قدرت بالا برای سم‌پاشی داخل ساختمان استفاده نکرد. پشه‌های جمع‌آوری‌شده در معرض دوز تشخیصی از پیش تعیین‌شده برای مدت زمان مشخصی (3 میکروگرم در میلی‌لیتر به مدت 40 دقیقه) قرار گرفتند و میزان مهار و مرگ و میر 24 ساعت پس از قرار گرفتن در معرض ثبت شد.
میزان مرگ و میر پشه‌های وحشی از ۹۱.۱۹٪ تا ۹۹.۴۷٪ و نسل F1 آنها از ۹۱.۷۰٪ تا ۹۸.۸۹٪ متغیر بود. بیست و چهار ساعت پس از مواجهه، میزان مرگ و میر پشه‌های وحشی از ۸۹.۳۴٪ تا ۹۸.۹۳٪ و نسل F1 آنها از ۹۰.۱۶٪ تا ۹۸.۳۳٪ متغیر بود.
نتایج این مطالعه نشان می‌دهد که ممکن است مقاومت در P. argentipes ایجاد شود، که نشان‌دهنده نیاز به نظارت و هوشیاری مداوم برای حفظ کنترل پس از ریشه‌کنی است.
لیشمانیوز احشایی (VL)، که در شبه قاره هند به عنوان کالاآزار شناخته می‌شود، یک بیماری انگلی است که توسط تک‌یاخته تاژک‌دار لیشمانیا ایجاد می‌شود و از طریق نیش پشه‌های خاکی ماده آلوده (Diptera: Myrmecophaga) منتقل می‌شود. پشه‌های خاکی تنها ناقل تایید شده VL در جنوب شرقی آسیا هستند. هند به دستیابی به هدف ریشه‌کنی VL نزدیک شده است. با این حال، برای حفظ میزان بروز پایین پس از ریشه‌کنی، کاهش جمعیت ناقل برای جلوگیری از انتقال احتمالی بسیار مهم است.
کنترل پشه‌ها در جنوب شرقی آسیا از طریق سم‌پاشی باقیمانده در فضای داخلی (IRS) با استفاده از حشره‌کش‌های مصنوعی انجام می‌شود. رفتار پنهانی و استراحت گونه‌های پا نقره‌ای، آنها را به هدف مناسبی برای کنترل حشره‌کش‌ها از طریق سم‌پاشی باقیمانده در فضای داخلی تبدیل می‌کند [1]. سم‌پاشی باقیمانده در فضای داخلی دی‌کلرودی‌فنیل‌تری‌کلرواتان (DDT) تحت برنامه ملی کنترل مالاریا در هند، اثرات سرریز قابل توجهی در کنترل جمعیت پشه‌ها و کاهش قابل توجه موارد VL داشته است [2]. این کنترل برنامه‌ریزی نشده VL، برنامه ریشه‌کنی VL هند را بر آن داشت تا سم‌پاشی باقیمانده در فضای داخلی را به عنوان روش اصلی کنترل VL اتخاذ کند. در سال 2005، دولت‌های هند، بنگلادش و نپال تفاهم‌نامه‌ای را با هدف حذف VL تا سال 2015 امضا کردند [3]. تلاش‌های ریشه‌کنی، شامل ترکیبی از کنترل ناقل و تشخیص سریع و درمان موارد انسانی، با هدف ورود به مرحله تثبیت تا سال 2015 انجام شد، هدفی که متعاقباً به سال 2017 و سپس 2020 تغییر یافت.[4] نقشه راه جهانی جدید برای حذف بیماری‌های گرمسیری نادیده گرفته شده، شامل حذف VL تا سال 2030 است.[5]
با ورود هند به مرحله پس از ریشه‌کنی BCVD، اطمینان از عدم ایجاد مقاومت قابل توجه در برابر بتا-سیپرمترین ضروری است. دلیل مقاومت این است که هم DDT و هم سیپرمترین مکانیسم عمل یکسانی دارند، یعنی پروتئین VGSC را هدف قرار می‌دهند [21]. بنابراین، خطر ایجاد مقاومت در پشه‌های خاکی ممکن است با استرس ناشی از قرار گرفتن منظم در معرض سیپرمترین بسیار قوی افزایش یابد. بنابراین، نظارت و شناسایی جمعیت‌های بالقوه پشه‌های خاکی مقاوم به این حشره‌کش ضروری است. در این زمینه، هدف از این مطالعه، نظارت بر وضعیت حساسیت پشه‌های خاکی وحشی با استفاده از دوزهای تشخیصی و مدت زمان قرار گرفتن در معرض تعیین شده توسط Chaubey و همکاران [20] بود. P. argentipes را از روستاهای مختلف در منطقه مظفرپور بیهار، هند، که به طور مداوم از سیستم‌های اسپری داخلی تحت درمان با سیپرمترین (روستاهای IPS مداوم) استفاده می‌کردند، مورد مطالعه قرار دادند. وضعیت حساسیت گونه‌های وحشی P. argentipes از روستاهایی که استفاده از سیستم‌های سم‌پاشی داخلی آغشته به سایپرمترین را متوقف کرده بودند (روستاهای IPS سابق) و روستاهایی که هرگز از سیستم‌های سم‌پاشی داخلی آغشته به سایپرمترین استفاده نکرده بودند (روستاهای غیر IPS) با استفاده از روش سنجش زیستی بطری CDC مقایسه شدند.
ده روستا برای مطالعه انتخاب شدند (شکل 1؛ جدول 1)، که هشت روستا سابقه سم‌پاشی مداوم با پیرتروئیدهای مصنوعی (هایپرمترین؛ به عنوان روستاهای هایپرمترین مداوم تعیین شدند) در فضای داخلی داشتند و در 3 سال گذشته موارد VL (حداقل یک مورد) داشتند. از دو روستای باقی مانده در مطالعه، یک روستا که سم‌پاشی داخلی بتا-سیپرمترین را اجرا نمی‌کرد (روستای سم‌پاشی غیرداخلی) به عنوان روستای شاهد و روستای دیگری که سم‌پاشی داخلی متناوب بتا-سیپرمترین را در فضای داخلی داشت (روستای سم‌پاشی داخلی متناوب/روستای سم‌پاشی داخلی سابق) به عنوان روستای شاهد انتخاب شدند. انتخاب این روستاها بر اساس هماهنگی با اداره بهداشت و تیم سم‌پاشی داخلی و اعتبارسنجی طرح اقدام خرد سم‌پاشی داخلی در منطقه مظفرپور انجام شد.
نقشه جغرافیایی منطقه مظفرپور که موقعیت روستاهای مورد مطالعه را نشان می‌دهد (1-10). مکان‌های مورد مطالعه: 1، مانیفولکاها؛ 2، رامداس مجهولی؛ 3، مادهوبانی؛ 4، آناندپور هارونی؛ 5، پاندی؛ 6، هیراپور؛ 7، مادهوپور هزاری؛ 8، حمیدپور؛ 9، نونفارا؛ 10، سیمارا. این نقشه با استفاده از نرم‌افزار QGIS (نسخه 3.30.3) و Open Assessment Shapefile تهیه شده است.
بطری‌های آزمایش‌های مواجهه طبق روش‌های Chaubey و همکاران [20] و Denlinger و همکاران [22] تهیه شدند. به طور خلاصه، بطری‌های شیشه‌ای 500 میلی‌لیتری یک روز قبل از آزمایش آماده شدند و دیواره داخلی بطری‌ها با حشره‌کش مشخص شده (دوز تشخیصی α-سیپرمترین 3 میکروگرم در میلی‌لیتر) با استفاده از محلول استون حشره‌کش (2.0 میلی‌لیتر) به کف، دیواره‌ها و درب بطری‌ها پوشانده شد. سپس هر بطری به مدت 30 دقیقه روی یک غلتک مکانیکی خشک شد. در این مدت، به آرامی درب را باز کنید تا استون تبخیر شود. پس از 30 دقیقه خشک شدن، درب را بردارید و بطری را بچرخانید تا تمام استون تبخیر شود. سپس بطری‌ها برای خشک شدن یک شبه باز گذاشته شدند. برای هر آزمایش تکرار، یک بطری که به عنوان کنترل استفاده شد، با 2.0 میلی‌لیتر استون پوشانده شد. همه بطری‌ها پس از تمیز کردن مناسب طبق روشی که توسط Denlinger و همکاران شرح داده شده است، در طول آزمایش‌ها دوباره استفاده شدند. و سازمان بهداشت جهانی [22، 23].
روز بعد از آماده‌سازی حشره‌کش، 30 تا 40 پشه وحشی (ماده گرسنه) از قفس‌ها در ویال‌ها خارج شده و به آرامی در هر ویال دمیده شدند. تقریباً به همان تعداد مگس برای هر بطری آغشته به حشره‌کش، از جمله بطری کنترل، استفاده شد. این کار را حداقل پنج تا شش بار در هر روستا تکرار کنید. پس از 40 دقیقه قرار گرفتن در معرض حشره‌کش، تعداد مگس‌های ناک‌داون شده ثبت شد. همه مگس‌ها با یک آسپیراتور مکانیکی گرفته شدند، در ظروف مقوایی نیم لیتری پوشیده شده با توری ریز قرار داده شدند و در یک انکوباتور جداگانه تحت شرایط رطوبت و دمای یکسان با همان منبع غذایی (توپ‌های پنبه‌ای خیس شده در محلول 30٪ شکر) مانند کلنی‌های درمان نشده قرار گرفتند. مرگ و میر 24 ساعت پس از قرار گرفتن در معرض حشره‌کش ثبت شد. همه پشه‌ها تشریح و برای تأیید هویت گونه بررسی شدند. همین روش با مگس‌های نسل F1 نیز انجام شد. میزان ناک‌داون و مرگ و میر 24 ساعت پس از قرار گرفتن در معرض ثبت شد. اگر مرگ و میر در بطری‌های کنترل کمتر از 5٪ بود، هیچ اصلاح مرگ و میر در تکرارها انجام نشد. اگر مرگ و میر در بطری کنترل ≥ 5% و ≤ 20% بود، مرگ و میر در بطری‌های آزمایش آن تکرار با استفاده از فرمول ابوت اصلاح شد. اگر مرگ و میر در گروه کنترل بیش از 20% بود، کل گروه آزمایش کنار گذاشته می‌شد [24، 25، 26].
میانگین مرگ و میر پشه‌های P. argentipes صید شده از طبیعت. میله‌های خطا نشان‌دهنده خطاهای استاندارد میانگین هستند. تقاطع دو خط افقی قرمز با نمودار (به ترتیب 90٪ و 98٪ مرگ و میر) نشان‌دهنده بازه مرگ و میر است که در آن ممکن است مقاومت ایجاد شود.[25]
میانگین مرگ و میر نسل F1 گونه‌های وحشی P. argentipes. میله‌های خطا نشان‌دهنده خطاهای استاندارد میانگین هستند. منحنی‌هایی که توسط دو خط افقی قرمز (به ترتیب 90٪ و 98٪ مرگ و میر) قطع شده‌اند، نشان‌دهنده محدوده مرگ و میر هستند که در آن مقاومت ممکن است ایجاد شود [25].
پشه‌های روستای کنترل/غیر IRS (مانیفولکاها) به حشره‌کش‌ها بسیار حساس بودند. میانگین مرگ و میر (± خطای استاندارد) پشه‌های صید شده از طبیعت 24 ساعت پس از مهار و مواجهه به ترتیب 99.47 ± 0.52٪ و 98.93 ± 0.65٪ و میانگین مرگ و میر فرزندان نسل اول به ترتیب 98.89 ± 1.11٪ و 98.33 ± 1.11٪ بود (جداول 2، 3).
نتایج این مطالعه نشان می‌دهد که پشه‌های خاکی پا نقره‌ای ممکن است در روستاهایی که از پیرتروئید (SP) α-سیپرمترین مصنوعی استفاده می‌شود، در برابر آن مقاومت ایجاد کنند. در مقابل، پشه‌های خاکی پا نقره‌ای جمع‌آوری‌شده از روستاهایی که تحت پوشش برنامه کنترل/IRS نیستند، بسیار حساس تشخیص داده شدند. نظارت بر حساسیت جمعیت پشه‌های خاکی وحشی برای نظارت بر اثربخشی حشره‌کش‌های مورد استفاده مهم است، زیرا این اطلاعات ممکن است به مدیریت مقاومت به حشره‌کش‌ها کمک کند. به دلیل فشار انتخاب تاریخی از سوی IRS که از این حشره‌کش استفاده می‌کند، سطوح بالای مقاومت به DDT به طور منظم در پشه‌های خاکی مناطق بومی بیهار گزارش شده است [1].
ما دریافتیم که پشه‌های P. argentipes به پایرتروئیدها بسیار حساس هستند و آزمایش‌های میدانی در هند، بنگلادش و نپال نشان داد که IRS در ترکیب با سایپرمترین یا دلتامترین از نظر حشره‌شناسی کارایی بالایی دارد [19، 26، 27، 28، 29]. اخیراً، روی و همکاران [18] گزارش دادند که پشه‌های P. argentipes در نپال در برابر پایرتروئیدها مقاومت ایجاد کرده‌اند. مطالعه حساسیت میدانی ما نشان داد که پشه‌های خاکی پا نقره‌ای جمع‌آوری‌شده از روستاهایی که در معرض IRS نبودند، بسیار حساس بودند، اما پشه‌های جمع‌آوری‌شده از روستاهای IRS متناوب/سابق و IRS مداوم (میزان مرگ و میر از 90٪ تا 97٪ متغیر بود، به جز پشه‌های خاکی آناندپور-هارونی که 89.34٪ مرگ و میر در 24 ساعت پس از مواجهه داشتند) احتمالاً در برابر سایپرمترین بسیار مؤثر مقاوم بودند [25]. یکی از دلایل احتمالی ایجاد این مقاومت، فشار اعمال شده توسط سم‌پاشی روتین داخل ساختمان (IRS) و برنامه‌های سم‌پاشی محلی مبتنی بر مورد است که رویه‌های استاندارد برای مدیریت شیوع کالاآزار در مناطق/بلوک‌ها/روستاهای بومی هستند (روش عملیاتی استاندارد برای بررسی و مدیریت شیوع [30]. نتایج این مطالعه نشانه‌های اولیه‌ای از ایجاد فشار انتخابی علیه سیپرمترین بسیار مؤثر را ارائه می‌دهد. متأسفانه، داده‌های حساسیت تاریخی برای این منطقه، که با استفاده از زیست‌سنجی بطری CDC به دست آمده‌اند، برای مقایسه در دسترس نیستند. همه مطالعات قبلی، حساسیت P. argentipes را با استفاده از کاغذ آغشته به حشره‌کش WHO بررسی کرده‌اند. دوزهای تشخیصی حشره‌کش‌ها در نوارهای تست WHO، غلظت‌های شناسایی توصیه شده حشره‌کش‌ها برای استفاده در برابر ناقلین مالاریا (Anopheles gambiae) هستند و کاربرد عملیاتی این غلظت‌ها برای پشه‌های خاکی مشخص نیست زیرا پشه‌های خاکی کمتر از پشه‌ها پرواز می‌کنند و زمان بیشتری را در تماس با بستر در زیست‌سنجی می‌گذرانند [23].
پیرتروئیدهای مصنوعی از سال 1992 در مناطق بومی VL در نپال، به جای آلفا-سیپرمترین و لامبدا-سیهالوترین SPها برای کنترل پشه خاکی استفاده شده‌اند [31]، و دلتامترین نیز از سال 2012 در بنگلادش استفاده شده است [32]. مقاومت فنوتیپی در جمعیت‌های وحشی پشه خاکی‌های پا نقره‌ای در مناطقی که پیرتروئیدهای مصنوعی برای مدت طولانی استفاده شده‌اند، شناسایی شده است [18، 33، 34]. یک جهش غیر مترادف (L1014F) در جمعیت‌های وحشی پشه خاکی هندی شناسایی شده است و با مقاومت در برابر DDT مرتبط بوده است، که نشان می‌دهد مقاومت به پیرتروئید در سطح مولکولی ایجاد می‌شود، زیرا هم DDT و هم پیرتروئید (آلفا-سیپرمترین) ژن یکسانی را در سیستم عصبی حشره هدف قرار می‌دهند [17، 34]. بنابراین، ارزیابی سیستماتیک حساسیت به سایپرمترین و نظارت بر مقاومت پشه‌ها در طول دوره ریشه‌کنی و پس از ریشه‌کنی ضروری است.
یکی از محدودیت‌های بالقوه این مطالعه این است که ما از سنجش زیستی ویال CDC برای اندازه‌گیری حساسیت استفاده کردیم، اما در تمام مقایسه‌ها از نتایج مطالعات قبلی با استفاده از کیت سنجش زیستی WHO استفاده شده است. نتایج حاصل از دو سنجش زیستی ممکن است مستقیماً قابل مقایسه نباشند زیرا سنجش زیستی ویال CDC، میزان مرگ و میر را در پایان دوره تشخیص اندازه‌گیری می‌کند، در حالی که سنجش زیستی کیت WHO، میزان مرگ و میر را در 24 یا 72 ساعت پس از مواجهه (دومی برای ترکیبات با اثر آهسته) اندازه‌گیری می‌کند [35]. یکی دیگر از محدودیت‌های بالقوه، تعداد روستاهای IRS در این مطالعه در مقایسه با یک روستای غیر IRS و یک روستای غیر IRS/سابق IRS است. ما نمی‌توانیم فرض کنیم که سطح حساسیت ناقل پشه مشاهده شده در روستاهای منفرد در یک منطقه، نماینده سطح حساسیت در سایر روستاها و مناطق بیهار است. با ورود هند به مرحله پس از حذف ویروس لوسمی، جلوگیری از توسعه قابل توجه مقاومت ضروری است. نظارت سریع بر مقاومت در جمعیت‌های پشه خاکی از مناطق، بلوک‌ها و مناطق جغرافیایی مختلف مورد نیاز است. داده‌های ارائه شده در این مطالعه مقدماتی هستند و باید با مقایسه با غلظت‌های شناسایی منتشر شده توسط سازمان بهداشت جهانی [35] تأیید شوند تا قبل از اصلاح برنامه‌های کنترل ناقل برای حفظ جمعیت کم پشه خاکی و پشتیبانی از حذف ویروس لوسمی، ایده دقیق‌تری از وضعیت حساسیت P. argentipes در این مناطق به دست آید.
پشه P. argentipes، ناقل ویروس لوکوز، ممکن است علائم اولیه مقاومت در برابر سایپرمترین بسیار مؤثر را نشان دهد. نظارت منظم بر مقاومت به حشره‌کش‌ها در جمعیت‌های وحشی P. argentipes برای حفظ تأثیر اپیدمیولوژیک مداخلات کنترل ناقل ضروری است. تناوب حشره‌کش‌ها با نحوه عملکرد متفاوت و/یا ارزیابی و ثبت حشره‌کش‌های جدید برای مدیریت مقاومت به حشره‌کش‌ها و پشتیبانی از حذف ویروس لوکوز در هند ضروری و توصیه می‌شود.
زمان ارسال: ۱۷ فوریه ۲۰۲۵