توسعه روشهای قابل اعتماد و استاندارد برای آزمایش حساسیت دستههای پشه به حشرهکشها برای درک اثربخشی مواد فعال یا فرمولاسیونهای جدید بسیار مهم است. روشهای آزمایش حساسیت دستههای پشه به حشرهکشها یا محصولات تماسی (مانند روشهایی که در برنامههای بهداشت عمومی ترویج میشوند) به خوبی تثبیت شده و استاندارد شدهاند. با این حال، اجرای مؤثر روشهای آزمایش برای حشرهکشهای فرار یا آئروسل مورد استفاده در محصولات خانگی دشوار است. بر اساس توصیههای سازمان بهداشت جهانی برای حشرهکشهای خانگی، ما یک روش استاندارد و با توان عملیاتی بالا برای آزمایش محصولات آئروسل با استفاده از پشههای قفسی و یک روش ضدعفونی مؤثر که در یک محفظه آزمایش Peet-Grady (محفظه آزمایش PG) انجام میشود، توسعه دادیم. ما اثربخشی این روش جدید را با استفاده از جمعیت پشههای مقاوم به حشرهکش و حساس Aedes و Anopheles تأیید کردیم. یکی از ویژگیهای جدید این روش، گنجاندن یک محفظه به سمت قفسهای پشه است که امکان ارزیابی کمی در زمان واقعی میزان کشتن پشهها پس از قرار گرفتن در معرض حشرهکش را فراهم میکند. ضدعفونی با سواب به طور موثری روغن آئروسل حاوی پایرتروئید باقی مانده را از سطح محفظه آزمایش پاک میکند، به طوری که میزان مرگ و میر برای پشههای حساسی که مستقیماً روی سطح محفظه آزمایش شدهاند، کمتر از 2٪ است. هیچ ناهمگونی مکانی در میزان کشتن یا مرگ و میر در بین پشههای قفسی در محفظه PG مشاهده نشد. روش قفس دوتایی ما هشت برابر توان عملیاتی بیشتری نسبت به روش پرواز آزاد ارائه میدهد و امکان آزمایش همزمان سویههای مختلف پشه و تمایز مؤثر بین جمعیتهای پشه حساس و مقاوم که به صورت موازی آزمایش میشوند را فراهم میکند.
تا به امروز، حشرهکشهای آئروسل عمدتاً در خانه برای محافظت شخصی استفاده میشدند و کاربرد محدودی در برنامههای بهداشت عمومی داشتند. با این حال، مطالعات اخیر نشان داده است که استفاده گسترده از حشرهکشهای خانگی در مناطقی که بیماریهای منتقله از طریق ناقلین شایع هستند، رایج است. چه انگیزه دفع پشه باشد و چه پیشگیری از بیماری، نیاز مبرمی به روشهای استاندارد و آسان برای غربالگری جمعیت پشههای بومی از نظر حساسیت به حشرهکشهای خانگی وجود دارد. این امر برای پیشبینی اثربخشی حشرهکشها در برابر ناقلین محلی و درک چگونگی تأثیر استفاده از حشرهکشهای خانگی بر انتخاب تکاملی برای مقاومت به حشرهکشها بسیار مهم است.
روش تکمیلی ۱، دستورالعملهای گام به گام دقیقی را برای انجام برنامه آزمایش حشرهکشهای آئروسل ما ارائه میدهد.
اگرچه دستورالعملهای سازمان بهداشت جهانی استفاده از نبولایزرهای خودکار را توصیه میکنند، اما مشخصات فنی خاصی ارائه نمیدهند. استفاده از نبولایزرهای خودکار بسیار مهم است، زیرا نبولایزر دستی در محفظه پروپیلن گلیکول نه تنها کار طاقتفرسایی است، بلکه میتواند باعث ناهماهنگی مکانی و تغییرات در مدت زمان نبولایزر نیز شود.
محفظه واکنش باید پس از هر آزمایش استریل شود، اما روش تمیز کردن داخلی توصیه شده در دستورالعمل سازمان بهداشت جهانی شامل استفاده از آب از شلنگ است. در کار روزانه ما، این روش پرزحمتترین مرحله در کار با تجهیزات بیوآنالیزی است، بنابراین ما یک روش استریلیزاسیون مبتنی بر سواب را توسعه داده و آزمایش کردیم.
قطعات جداشدنی پنکه مطابق روش فوق عمل میشوند و پرهها و قاب پنکه با اسفنجی که در محلول ۵٪ دکون ۹۰ خیس شده است، تمیز میشوند.
بر اساس رابطه بین مدت زمان اسپری و میزان تحویل محصول، دستگاه پخش آئروسل ما همچنین دقت خوبی در کنترل نسبت دوز آئروسل، حداقل در محدوده آزمایش شده ۱ تا ۴ برابر، نشان داد. همانطور که در شکل ۳b نشان داده شده است، این ویژگی به ویژه برای توصیف رابطه دوز-پاسخ فرمولاسیونهای جدید آئروسل یا تعیین دوز شناسایی برای تشخیص مقاومت به حشرهکش مهم است.
ما نشان میدهیم که پروتکل اصلاحشده ما برای ارزیابی حشرهکشهای آئروسل خانگی، با استفاده از ضدعفونی با سواب، قفسهای دوتایی، سمپاشهای کنترل از راه دور و ضبط بیومتریک از دوربینهای اکشن، جایگزین مؤثرتر و عملیتری برای روشهای فعلی است.سازمان بهداشت جهانیتوصیهها. روش ضدعفونی با سواب، که تنها به 20 دقیقه زمان نیاز دارد، در مقایسه با پروتکل موجود (که معمولاً به یک ساعت برای هر محفظه آزمایش نیاز دارد) به طور قابل توجهی در زمان صرفهجویی میکند. همچنین زمانی را که اپراتورها صرف پوشیدن تجهیزات حفاظت فردی کامل (مانند کلاه ایمنی تنفسی و لباس کار آنتی استاتیک) میکنند، کاهش میدهد. علاوه بر این، این روش در مقایسه با تمیز کردن کامل محفظه آزمایش، مایع و لباس آلوده کمتری برای تصفیه تولید میکند و در نتیجه احتمال آلودگی اتاقی که محفظه آزمایش در آن قرار دارد را به حداقل میرساند. روش ضدعفونی با سواب همچنین برای ضدعفونی اتاقهای آزمایش نیمه دائمی که نیاز به ... دارند، مناسب است.حداقلچیدمان مبلمان در چیدمانهای مختلف اتاق.
یک مسئله کلیدی که در این مطالعه و سایر مطالعات بررسی شده است، استانداردسازی دوزهای مواجهه حشرهکشهای مورد استفاده در محیط در پروتکلهای مختلف آزمایش است. همانطور که در شکل 2b نشان داده شده است، با وجود مدت زمان اسپری ثابت، حجم اسپری در انواع قوطیهای آئروسل متفاوت بود که به طور بالقوه نشاندهنده تفاوت در فرآیندهای تولید (به عنوان مثال، فشار داخلی، استفاده از پیشران، ساختار نازل و غیره) است. علاوه بر این، فقدان فعلی دستگاههای اسپری از راه دور موجود در بازار با انعطافپذیری لازم در مدت زمان اسپری، استفاده از آنها را در ارزیابی رابطه دوز-پاسخ برای کنترل پشه محدود میکند. اسپری دستی از طریق دریچههای آزمایش یا دریچههای دسترسی (در صورت وجود) میتواند منجر به تغییرات در دوزهای مواجهه شود. در واقع، نتایج ما نیاز و اهمیت کاهش این منابع تغییر را برجسته میکند. برای جمعیتهای مقاوم Aedes aegypti، ما همبستگی بین دوز آئروسل و تعیین نهایی حساسیت یا مقاومت مشاهده کردیم (شکل 3b). در حالت ایدهآل، دوزهای آئروسل باید به جای مدت زمان آئروسل شدن، بر اساس گرم ماده آئروسل شده استاندارد شوند تا مقایسه بین مطالعات مختلف تسهیل شود.
RCAD یک رویکرد جایگزین برای تحقیقات آینده ارائه میدهد که تأثیر تغییرات فرآیند را به حداقل میرساند. اگرچه دریافتیم که استانداردسازی اسپریهای آئروسل امکانپذیر نیست، اما نشان دادیم که جرم آئروسل منتقل شده از طریق قوطیهای آئروسل مختلف را میتوان با کالیبره کردن طول اسپری به طور قابل تکرار تخمین زد (شکلهای 2b، 3a). چنین استانداردسازی غلظت آئروسل در هر محفظه آزمایش برای بهبود تکرارپذیری نتایج بسیار مهم است.
بر اساس تجربه ما و سایر گروههای تحقیقاتی، توصیههای مندرج در دستورالعمل فعلی در مورد استفاده از روشهای تشخیص آئروسل برای آزمایش پشههای آزاد، چالشهای لجستیکی قابل توجهی را برای مطالعات آزمایشگاهی و نیمهمیدانی ایجاد میکند. به عنوان مثال، روشهای تشخیص پشه آزاد، توان عملیاتی بسیار کمی دارند (از جمله جمعآوری مجدد پشههای آزاد زنده مانده که به نیروی کار زیادی نیاز دارد) و از تعدادی محدودیت فنی، مانند دشواری در تعیین نرخ کشتار در زمان واقعی، رنج میبرند.
اگرچه آزمایش قفس دوگانهی معتبر ما به مسئلهی محدودیتهای جریان میپردازد و روشی عملی برای غربالگری حساسیت پشهها به حشرهکشهای آئروسل است، باید توجه داشت که میزان مرگ و میر پشههای جزایر کیمن در آزمایش قفس به طور قابل توجهی کمتر از آزمایش پرواز آزاد بود (شکل 5c، جدول 1). این تفاوت ممکن است نشاندهندهی کاهش دوز حشرهکش در داخل قفس باشد، زیرا قطرات آئروسل کمتری از توری نفوذ کرده و وارد قفس میشوند. مطالعات آینده میتوانند از پارچههای توری بزرگتر و طرحهای قفس با نرخ جریان هوای فن بالاتر (مثلاً طرحهای استوانهای) برای اعتبارسنجی بیشتر نتایج به دست آمده با روشهای مختلف تجربی استفاده کنند.
زمان ارسال: فوریه-02-2026